血液?jiǎn)魏思?xì)胞比紅細(xì)胞和粒細(xì)胞的密度都小,把血細(xì)胞懸浮液鋪放在合適的分離介質(zhì)上,紅細(xì)胞和粒細(xì)胞通過分離介質(zhì)形成沉淀,單核細(xì)胞被屏障在分離介質(zhì)上。把等體積的抗凝血與0.9%氯化鈉溶液混合,取6mL稀釋的血液鋪放在3mL分離介質(zhì)上,然后用落地式低速冷凍離心機(jī)在600g離心20min,血細(xì)胞被分成兩部分,分界面處的白色區(qū)帶是單核細(xì)胞和血小板,通過屏障層形成的沉淀是紅細(xì)胞和粒細(xì)胞。
把白色區(qū)帶上面的上清液(血漿)吸出,然后吸出單核細(xì)胞層(盡可能與較多的分離介質(zhì)一起吸出),再將沉淀上面的分離介質(zhì)吸出。把細(xì)胞沉淀重懸在2mL0.9%氯化鈉溶液里,移至另一離心管,再加5mL 0.9%氯化鈉溶液,用落地式低速冷凍離心機(jī)在600g離心7min,在沉淀中加入0.9%氯化鈉溶液,終體積為3mL,再加入適量6%Dextran溶液,紅細(xì)胞沉降后,收集上清液而得到粒細(xì)胞。
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